7 040 ₴
Показати оптові ціниЗгідно з чинним законодавством аналіз генетично модифікованих організмів можна проводити спираючись на аналіз ДНК (ДСТУ ISO 21569: 2008 Продукти харчові. Методи виявлення генетично модифікованих організмів і отриманих з них продуктів. Методи, засновані на якісному визначенні нуклеїнових кислот, ДСТУ ISO 21570: 2008 Продукти харчові. Методи виявлення генетично модифікованих організмів і отриманих з них продуктів. Методи, Засновані на визначенні кількісно нуклеїнових кислот (ISO 21570: 2005, IDT) Д ТУ ISO 21571: 2008 Продукти харчові. Методи виявлення генетично модифікованих організмів і отриманих з них продуктів. Екстракції нуклеїнових кислот (ISO 21571: 2005, IDT) або протеїнів (ДСТУ ISO 21572: 2006 Продукти харчові. Методи аналізу для визначення генетично модифікованих організмів і похідних продуктів. Методи, засновані на аналізі протеїну (ISO 21572: 2004, IDT).
Визначення за допомогою ПЛР відбувається за рахунок виявлення специфічної ДНК, на пошук якої спрямована та чи інша тест система, або набір праймерів. Перелік специфічних послідовностей за якими проводиться пошук ГМО дуже широкий. Раніше для виявлення більшості комерційних сортів генетично модифікованих рослин досить було виявляти класичні послідовності промотору 35S (вірусу мозаїки цвітної капусти) і термінатора NOS (нопалинсинтазы), на виявлення цих конструкцій спираються діючі Вітальня. В даний час проявляти такі генетичні конструкції мало оскільки багато компаній при розробці нових сортів ГМ рослин використовують зовсім інші генетичні конструкції. Так для повного аналізу на наявність ГМ конструкцій необхідно перевіряти багато типів генетичних елементів, а для кількісного аналізу використовувати набори, які виявляють тільки кількісний вміст промотору 35S мало. Для кількісного аналізу потрібно використовувати набори, які виявляють зміст окремих ліній ГМ рослин. Вартість якісного і кількісного аналізу при повному аналізі висока.
Альтернативний метод аналізу за допомогою імуно-хроматографічних тестів (т. зв. тест-смужок) дозволяє швидко ідентифікувати наявність стороннього білка в зразках. Якщо кількість генетичних конструкцій дорівнює кількості ліній ГМ рослин, то кількість білків, що експресуються в цих рослинах обмежена. Так, наприклад, для виявлення ГМ сої досить виявити лише 2 протеїну (зазвичай достатньо 1), для кукурудзи 8 протеїнів (або 2 найпоширеніші), для ріпаку 2 протеїну.
Найчастіше в Україні виявляються лінії, які містять гени стійкості до гербіцидів, це лінії RoundupReady і LibertyLink. Тест смужки, які широко використовуються в Україні дозволяють виявляти вміст ГМ зерна з чутливістю до 0,1%, що цілком достатньо для впевненого виключення негативних зразків з подальшого аналізу. Всі зразки яких за допомогою тест-смужок виявляють ГМО далі спрямовуються на аналіз за допомогою ПЛР для підтвердження і визначення концентрації. Використання спеціальних буферних розчинів для екстракції ГМ протеїнів у поєднанні з використанням спеціальних рідерів дозволяє усунути людський фактор в оцінці результатів імуно-хроматографічних тестів (тест-смужок) і дозволяє отримати індикативний підлозі-кількісний результат, який визначається в діапазоні вмісту ГМО у відсотках, наприклад діапазон від 1% до 2%, 1,53%.
Слід зауважити, що подібна невизначеність характерна і для методу ПЛР, оскільки результат двох паралельних аналізів може відрізнятися до 2 разів, але не більше.
Тест-смужки AgraStrip ® від RomerLabs мають кращу репутацію в світі і в Україні. Для виявлення вмісту ГМО в зернових використовуються спеціальні високочутливі тест-смужки AgraStrip ® TraitCheck, які можуть проявляти до 1 ГМ зерна на 1000 ГМ зерен. Як вже зазначалося використання таких тестів передбачено в ГОСТ 21572: 2006, а процедура використання розроблена виробником.
В Україні їм довіряють понад 150 компаній, серед яких Укрелеваторпром, Бунге, СЖС Україна, А. Т. К., Миронівський Хлібопродукт та інші.
Рис. 1 Тесті Romer Labs AgraStrip
Швидкість | Тільки 1-5 хвилин для аналізу |
Можливість архівування | Смужки можуть бути заархивированны якщо відрізати поглинають подушечки |
Простота у використанні |
Екстракція проста і не вимагає стадії очищення |
Дешевизна |
Широкий вибір форматів аналізу |
Чутливість |
Дуже низький поріг чутливості до 0.05% ГМО |
Стабільність | Термін придатності 12 місяців (крім LL для кукурудзи - 6 місяців) |
Найважливіші сільськогосподарські культури часто бувають генетично модифицированны шляхом введення в ДНК-послідовність рослин ДНК-матеріалу, взятого від сторонніх організмів, щоб рослини отримали нові властивості, які зазвичай не виникають у природі, такі як стійкість до гербіцидів або комах. Насіння, отримані від ГМО-рослин, також успадкує ці зміни.
В даний час культивується в основному чотири генетично модифіковані культури: соя, кукурудза, бавовна і ріпак. У 2004 році ГМО-культури становили 26% світових посівних площ (51%, 12%, 24% і 15% посівних площ сої, кукурудзи, бавовни й рапсу відповідно). У світовому обсязі продажів цих культур та їх основних похідних домінують матеріали генномодифікованого походження (90% торговельного обороту сої, 80% кукурудзи, 70% олійного ріпаку і 45% насіння бавовни, включаючи змішані з ГМО та не - ГМО матеріали). Незважаючи на те, що більшість соєвих бобів і їх основних похідних, споживаних у Європейському Союзі, мають імпортне походження, велика частина споживаної кукурудзи, ріпаку та насіння бавовни, вироблені на внутрішньому ринку (в основному не - ГМО).
Попит на випробування ГМО виходить з бажання довести відсутність ГМО у продуктах з маркуванням "без ГМО", з одного боку, і, з іншого боку, бажання контролювати походження продукту і отримувати ліцензійні відрахування за ГМО продукти.
У наступному списку описуються основні протеїни (які були отримані в результаті генетичної модифікації) та відповідні їм характеристики та торгові назви. Ми пропонуємо тест-системи для імунохроматографічного аналізу та ІФА на всі ці нові генетичні ознаки.
Експресія трансгенного протеїну CP4 EPSPS в рослинах виражається в їх стійкості до гербіцидів Roundup®. Roundup® - це гербіциди широкого спектру дії для боротьби з бур'янами. Кукурудза з цим генетичним ознакою продається під торговою назвою Roundup Ready®.
Протеїн холодового шоку В, внесений компанією Монсанто в лінію MON87460 для підвищення морозостійкості.
Експресія трансгенного протеїну Bt-Cry1F в рослинах виражається в їх стійкості до шкідників. Кукурудза з цим генетичним ознакою продається під торговою назвою Herculex®.
Експресія трансгенного протеїну Bt-Cry34Ab1 в рослинах виражається в їх стійкості до комах. Кукурудза з цим генетичним ознакою продається під торговою назвою Herculex® RootWorm.
Експресія трансгенного протеїну Bt-Cry9C в рослинах виражається в їх стійкості до європейського кукурудзяному до метелика і переносимості гербіциду фосфінотрицину. Кукурудза з цим генетичним ознакою отримала торгова назва StarLink®. Є повідомлення про потенційну алергенність Cry9C. Тому кукурудзи StarLink® заборонена для продажу.
Експресія трансгенного протеїну Bt-Cry1Ab виражається в стійкості до європейського кукурудзяному до метелика. На ринку представлена кукурудза з цим генетичним ознакою, отримана різними способами, яка, відповідно, продається під різними торговими марками, у тому числі YieldGard® Corn Borer, Bollgard® (BG), NaturGard™ (E176), Knockout™ (E176) і Bt -Xtra™.
Внесено компанією Syngenta в кукурудзу для забезпечення стійкості до комах. Така кукурудза має торгова назва Duracade®.
Експресія трансгенного протеїну Bt-Cry3Bb1 в рослинах виражається в їх стійкості до злаковому кореневого черв'якові. Кукурудза з цим генетичним ознакою має торгова назва YieldGard® RootWorm.
Експресія трансгенного протеїну Bt-Cry3Bb1 в рослинах виражається в їх стійкості до злаковому кореневого черв'якові. Експресія трансгенного протеїну Bt-Cry1Ab виражається в стійкості до європейського кукурудзяному до метелика. Кукурудза з двома генетичними ознаками (трансформаційне подія MON863 і MON810) має торгова назва YieldGard® Plus.
Експресія трансгенного протеїну Bt-Cry2Ab в рослинах виражається в їх стійкості до лускокрилих шкідників, включаючи, але не обмежуючись, совку бавовняну, рожевого коробкового хробака, тютюнову листовертку. Бавовна з цим генетичним ознакою має торгова назва Bollgard® II.
Експресія трансгенного протеїну PAT в рослинах виражається в їх переносимості гербіциду фосфінотрицину, особливо глюфосината амонію. Він часто використовується в якості маркера генетичної трансформації. Кукурудза, канола, бавовна, цукровий буряк і рис з цим генетичним ознакою продаються під торговою маркою Liberty-Link™.
Експресія трансгенного протеїну Vip3A в рослинах виражається в їх стійкості до жесткокрылым шкідників. Кукурудза й бавовна з цим генетичним ознакою продаються під торговими марками VipTera™ і VipCot™.
Протеїн изомеразы фосфоманнозы (PMI) експресується завдяки гену, взятому від E. coli, і часто використовується в якості генетичного маркера ГМО продуктів. Цей ген був впроваджений в кукурудзу, пшеницю та інші культури і продається під торговою маркою Positech ®.
Референсним методом випробування на ГМО є полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР), яку зазвичай проводять у добре обладнаних лабораторіях рутинного аналізу, таких як аналітичні лабораторії Romer Labs. Ці аналізи включають якісні методи скринінгу ДНК, а також високоточні кількісні визначення окремих ГМО (ідентифікацією ДНК) в різних харчових продуктах і кормах, наприклад в партіях зерна та перероблених харчових продуктах.
На ринку експрес-тестів на ГМО представлені також швидкі методи випробувань, такі як тест смужки AgraStrip ® GMO TraitChek™. Ці тест-смужки призначені для проведення випробувань в польових умовах, хоча вони можуть застосовуватися і в лабораторіях. Швидке виявлення генномодифікованого протеїну в необроблених агропродуктах і кормах має важливе значення для прийняття рішень в ланцюгу поставок харчових продуктів і кормів. Ці тест-смужки можна досліджувати з допомогою рідера AgraVision ™, щоб отримати напівкількісний результат аналізу ГМО в партії зерна.
Матриця |
Досліджуваний протеїн |
Чутливість |
Час аналізу |
Тип тіста |
Кукурудза |
СР4 EPSPS |
0,125% |
1-3 хв |
Количественны/ якісний |
Bt-Cry9C |
0,125% |
1-3 хв |
Кількісний |
|
Bt-Cry-1F |
0,9% |
1-3 хв |
Количественны/ якісний |
|
Bt-Cry 1 Ab |
0,9% |
1-3 хв |
Количественны/ якісний |
|
Bt-Cry3Bb |
0,125% |
1-3 хв |
Количественны/ якісний |
|
PAT |
0,9% |
1-3 хв |
Кількісний |
|
Bt-Cry34Ab 1 |
0,125% |
1-3 хв |
Кількісний |
|
Vip3A |
0,33% |
1-3 хв |
Количественны/ якісний |
|
eCry 3.1 Ab |
5 хв. |
Якісний |
||
CspB |
10 хв |
Якісний |
||
PMI |
1-3 хв |
Якісний |
||
EPSPS |
1-3 хв |
Якісний |
||
Бавовна |
CP4 EPSPS |
1-3 хв |
Якісний |
|
Bt-Cry-1F |
1-3 хв |
Якісний |
||
Bt-Cry2Ab |
1-3 хв |
Якісний |
||
Bt-Cry 1 Ab |
1-3 хв |
Якісний |
||
PAT |
1-3 хв |
Якісний |
||
Bt-Cry Ac 1 |
1-3 хв |
Якісний |
||
Vip3A |
1-3 хв |
Якісний |
||
Ріпак |
CP4 EPSPS |
0,1% |
1-3 хв |
Кількісний/ якісний |
PAT |
2% |
1-3 хв |
Кількісний |
|
Соя |
CP4 EPSPS |
0,1% |
1-3 хв |
Кількісний/ якісний |
CP 4 EPSPS в смаженої сої |
0,9% |
1-3 хв |
Кількісний |
|
PAT |
0,5% |
1-3 хв |
Кількісний/ якісний |
|
Bt-Cry1Ac |
0,5% |
5 хв |
Якісний |
|
Люцерна |
CP4 EPSPS |
0,167% |
1-3 хв |
Кількісний |
Цукрові буряки |
СР4 EPSPS |
0,1% |
1-3 хв |
Кількісний/ якісний |
PAT |
0,9% |
1-3 хв |
Кількісний |
|
Рис |
PAT |
0,05% - 2% |
1-3 хв |
Кількісний |
Для отримання кількісної оцінки даних, з використанням тест-смужок AgraStrip , використовують AgraVision рідер - чутливий, зручний і легкий у використанні кількісний інструмент для обробки даних. Зчитує інформацію з тест-смужок і видає кінцевий результат у відсотковому значенні. Рідер може працювати як автономно, за рахунок вбудованої батареї, так і від мережі з допомогою спеціального блоку живлення, що поставляється з ним разом.
AgraVision рідер поставляється в комплекті з лотками для тестів на ГМО і мікотоксини. В комплект також включений термопринтер для друку результатів. Крім того, у комплекті є всі необхідні аксесуари (кабелі, блок харчування, набори для чищення та ін.) Рідер поставляється в зручному захисному кейсі.
Рис. 3 AgraVision рідер
Рідер може бути використаний не тільки для аналізу ГМ рослин, а також для виявлення зараження зерна мікотоксинами.
Рис. 4 Інші набори серіїї Agrastrip WATEX
Зручні прості набори серіїї Agrastrip WATEX для кількісного аналізу вмісту мікотоксинів дають можливість провести дослідження в польових умовах. Вони не вимагають використання органічних розчинників (екстракція водою), при аналізі всього 3 хвилини.